lunes, 18 de junio de 2018

Estancia científica en Japón (4): extracción del esperma de fugu


Cuando capturamos los peces globo que vienen a reproducirse en la playa estamos seguros de que se trata de machos y de hembras maduros sexualmente. Eso supone que los machos sean fluyentes, es decir, que tienen esperma maduro que podemos utilizar en nuestros experimentos.
En el caso de esta especie, generalmente muy tranquila, no se precisa el uso de anestesia, y tratamos de realizar el proceso de forma rápida. Eso sí, si se estresan, se pueden hinchar (como en la primera foto) y entonces hay que esperar a que se deshinchen. Como en otras especies de peces marinos, la extracción del esperma debe comenzar con un lavado de la zona abdominal con abundante agua destilada para tratar de evitar la absorción con la muestra de agua marina, heces u orina, que podrían activar la movilidad del esperma, que está inmóvil en el interior del espermiducto.

A continuación, se seca bien la zona con papel absorbente y se realiza un pequeño masaje abdominal (stripping) en dirección céfalo-caudal (de cabeza a cola), para hacer salir el esperma. Se debe de tratar no absorber orina o heces, en especial si los peces se han capturado el mismo día o pocos días después y tienen todavía restos en el intestino.

En este caso estamos utilizando una pipeta automática de 5 ml para hacer la succión y eppendorfs para mantener las muestras, normalmente a 4 ºC.

Las muestras frescas no aguantan especialmente bien si no se diluyen. Por eso lo estamos diluyendo 1:50 en medio SLS (seminal plasma-like solution) descrito por Krasznai et al. (2003), aunque nos planteamos tratar de mejorarlo para conseguir una supervivencia a más largo plazo.

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