Estancia de David S. Peñaranda en París

Durante el mes de julio, nuestro compañero David S. Peñaranda ha realizado una estancia en el Laboratory BOREA del Muséum National d’Histoire Naturelle (MNHN) de París, dirigido por nuestra colega y amiga la Dra. Sylvie Dufour (en la foto con David).

Los principales objetivos de la estancia han sido:

1) La puesta a punto de un protocolo para el cultivo in vitro de testículo de anguila europea, que se ha basado en protocolos previamente descritos para otras especies.

2) Evaluar in vitro el efecto de diferentes dosis de esteroides y sus efectos sinérgicos/antagónicos en el transcriptoma de la hipófisis de esta especie y, en especial, sobre los receptores del factor liberados de las gonadotropinas (GnRH-R).

Tanto el MNHN como la UPV han participado en el Proyecto europeo PRO-EEL y seguirán esta colaboración en el marco del proyecto REPRO-TEMP (“La anguila europea como modelo para estudiar la temperatura como modulador de la maduración sexual en teleosteos. Potencial aplicación en acuicultura”) financiado por el Ministerio Español de Economía y Competitividad (MINECO).

La estancia ha sido financiada mediante una Short Term Scientific Mission de la Acción COST AQUAGAMETE.

La Acción COST AQUAGAMETE financiará 17 nuevas estancias

Como resultado de su cuarta convocatoria de estancias cortas (Short Term Scientific Missions), la Acción COST AQUAGAMETE financiará parte de 17 nuevas estancias durante los próximos meses.

Los investigadores implicados viajarán de España a Francia (1); República Checa a Francia (2); República Checa a Italia (1); Hungría a España (1); España a Portugal (4); Portugal a España (1); Portugal a Francia (2); España a Noruega (1); España a Israel (1); España a Brasil (1); Italia a Noruega (1); y Eslovenia a Portugal (1).

La quinta convocatoria de STSM está prevista para el mes de octubre de 2014.

Nuestro último artículo, aceptado en Aquaculture

Temperature modulates the progression of vitellogenesis in European eel

I. Mazzeo, D.S. Peñaranda, V. Gallego, S. Baloche, R. Nourizadeh-Lillabadi, H. Tveiten, S. Dufour, J.F. Asturiano, F.-A. Weltzien, L. Pérez

Wild female European eels were matured with CPE (carp pituitary extract) under three thermal regimes, two of which were variable (T10-15 and T15-18, moving from 10 to 15 ºC and from 15 to 18 ºC, respectively) and one constant, at 18 ºC (T18). Before and during hormonal treatment, the eels were sampled and biometric measurements were taken. Immunoassays of sex steroids and vitellogenin were performed, as well as qPCR analyses of gene expression (ovarian cyp19a1) and ovarian histology. Prior to the hormonal treatment, the silver eels which had been maintained at 18 ºC showed lower 11-KT and E2 plasma levels compared to those maintained at 10 ºC. In addition, in the early vitellogenic stage, the androgen and cyp19a1 levels were lower at 18 ºC than at 10 ºC. Both these results and the positive correlations found between GSI and 11-KT (at the PV stage) and between oocyte diameter and cyp19a1 levels (in the EV stage), suggest that early ovarian development is facilitated at low temperatures.

Vitellogenesis was induced by CPE in all the thermal groups, but progression to the mid-vitellogenic stage was only observed after an accumulation of 900-1200 ºD, at 15 or 18ºC, and progression to the late vitellogenic stage was only observed after an accumulation higher than 1300 ºD, at 18 ºC. Although temperature increased the rate of CPE-induced ovarian development, our results clearly indicate that this increase is not linear, but exponential, with acceleration in the increase of GSI at 18 ºC from the mid-vitellogenic stage, or after an accumulation of 1300 ºD. For the first time, a down-regulation of ovarian cyp19a1 caused by high temperatures in CPE-treated eels was observed. These results demonstrate that temperature can modulate eel ovarian development both before and after exogenous hormonal stimulation, and this knowledge could be used to manipulate the timing of vitellogenesis progression under laboratory conditions.

Congelando esperma de pez cebra, III: ¿qué resultados se han obtenido?

Hace unos días procedimos a descongelar las muestras de esperma de pez cebra que habíamos ido congelando las últimas semanas. Sacamos las muestras de los depósitos de nitrógeno y las fuimos descongelando en un baño caliente para inmediatamente evaluar el porcentaje de espermatozoides capaces de moverse tras activar con agua, así como el porcentaje de células viables, utilizando una tinción fluorescente.

Empezamos a tener claro qué crioprotector es el que proporciona mejores resultados, pero serán necesarios nuevos experimentos aumentando el número de muestras y usando diferentes concentraciones del crioprotector, rampas de congelación y otras variables. 

Congelando esperma de pez cebra, II: ¿cómo?

Pues, entre otras cosas, en eso estamos durante nuestra estancia en Portugal. Hemos tratado de congelar esperma de pez cebra mediante masaje abdominal y congelarlo inmediatamente, usando diferentes crioprotectores como parte del medio de congelación.

La selección de los ejemplares y el control de la anestesia ha sido cosa de Gil (en la foto), el técnico del Grupo de EDGE (Grupo de Biología Molecular de Organismos Marinhos) encargado del mantenimiento de los cebra.

Una vez anestesiados los peces, extrayendo el esperma hemos estado Paulo Gavaia y yo mismo. Como veis en las fotos, Paulo hacía el masaje abdominal utilizando una pinza ancha (y mucho mimo) mientras yo trataba de obtener la muestra de esperma. La cosa no es fácil porque lo normal ha sido obtener entre 1 y 3 microlitros de los macho fluyentes. Para ello, nos hemos planteado el uso de varias herramientas (micropipetas, jeringas y similares), pero de momento la mejor opción nos ha parecido usar estos capilares conectados a un tubo de succión. Una herramienta de 1977!!, como veis en la tapa.

Marta F. Riesco ha estado diluyendo las muestras en los distintos medios de congelación y congelándolas en hielo seco antes de transferirlas a los depósitos de nitrógeno líquido para su almacenamiento.

Y finalmente Elsa Cabrita y Luz Pérez han utilizado el volumen restante de las muestras para evaluar su movilidad antes de la congelación utilizando un software CASA.

Curso de análisis de calidad de anguila

Announcement

ICES Workshop of a Planning Group on the Monitoring of Eel Quality: “Development of standardized and harmonized protocols for the estimation of eel quality.” (WKPGMEQ)

At INBO, Brussels, Belgium, 20-22 January 2015

The European eel (Anguilla anguilla) stock has been declining for several decades. Pollution by bioaccumulating toxic compounds and the impact of (new) disease agents have been suggested as possible causes for this decline. The ICES WGEEL 2012 stated, that, to improve the assessment of the impact of contaminants and diseases on effective spawner biomass and reproductive success of the European eel, national routine monitoring programmes are urgently required. The WGEEL 2012 and OSPAR recommended Member States to implement routine monitoring of eels for lipid levels, contamination and diseases. They also identified the need to develop standardized and harmonized protocols for the estimation of eel quality. This would create the possibility, to compare national data and to reliably incorporate them into international stock assessments. Measuring contaminant levels in eel relates to the Eel Regulation (Council Regulation No 1100/2007), to the 2013 EC Directive dealing with Priority Substances under the Water Framework Directive (2013/39/EC and 2008/105/EC) and to the Commission Regulation No 1881/2006 setting levels for a number of contaminants in foodstuffs to protect public health, a.o.

The Workshop aims to design standardized and harmonized monitoring protocols, and to facilitate the integration of eel quality parameters in quantitative assessment of the reproductive potential of the stock.

Objectives:

a )   design standardized and harmonized protocols for the estimation of eel quality with regard to the bioaccumulation of contaminants (including sampling, analysis and reporting).

b )   design standardized and harmonized protocols for the estimation of eel quality with regard to diseases (including sampling, analysis and reporting).

A report will be prepared and finalized by 28 February 2015 for the attention of ICES.

Webpage : http://www.ices.dk/community/groups/Pages/WKPGMEQ.aspx

Experts involved in the monitoring, analysis or reporting of contaminants in and/or diseases of the eel are invited to sign up for participation to this workshop by sending an email on their application before 1^st of October, 2014 to Claude Belpaire Claude.Belpaire@inbo.be and Olga Haenen Olga.Haenen@wur.nl